ForeDirect RT-qPCR komplet
Opis kompleta:
◮Za izravno pojačanje RNK u stvarnom vremenu iz zbirki briseva bez procesa pročišćavanja RNK.Ovaj komplet dovršava qRT-PCR cikluse unutar jednog sata.Mješavina enzima je optimizirana mješavina reverzne transkriptaze, Hot-Start Taq DNA polimeraze, inhibitora RNaze.Reakcijski pufer sadrži sve potrebne komponente, uključujući optimizirane komponente pufera, Mg2+, dUTP i dNTP.
Opis
ForeDirect RT-qPCR komplet dizajniran je za izravno pojačanje RNA u stvarnom vremenu iz zbirki briseva bez procesa pročišćavanja RNA.Ovaj komplet dovršava qRT-PCR cikluse unutar jednog sata.Mješavina enzima je optimizirana mješavina reverzne transkriptaze, Hot-Start Taq DNA polimeraze, inhibitora RNaze.Reakcijski pufer sadrži sve potrebne komponente, uključujući optimizirane komponente pufera, Mg2+, dUTP i dNTP.
Tehnički podaci
100T
Komponente kompleta
| Sredstvo za otpuštanje nukleinske kiseline |
| RNK zaštitnik |
| 2× RT-qPCR pufer |
| Mješavina enzima (Taq&M-MLV) |
| upute |
PCR aplikacija
1. Nakon što se PCR reakcijske epruvete nakratko centrifugiraju, stavite ih u spremnik uzorka instrumenta za pojačavanje.
2. Toplinski protokol
| Korak | Temperatura | Vrijeme | Ciklusi | |
| 1 | Obrnuta transkripcija | 50 ℃ | 15 min | 1 |
| 2 | Preddenaturacija | 95 ℃ | 1 minuta | 1 |
| 3 | Denaturacija | 95 ℃ | 10 sekundi | 42 |
| 4 | Žarenje/proširenje | 60 ℃ | 30 sekundi | |
Bilješka:Fluorescentni signal detektiran je neposredno nakon produžetka svakog ciklusa.
3. Nakon postavljanja, spremite datoteku i pokrenite reakcijski program.
Radni koraci
Prije pripreme reagensa, sve reagense u kompletu treba otopiti na sobnoj temperaturi i lagano promiješati.
Priprema reagensa
1. Pripremite smjesu za otpuštanje nukleinske kiseline
| komponenta | Volumen po uzorku ili kontroli |
| Sredstvo za otpuštanje nukleinske kiseline | 5 μL |
| RNK zaštitnik | 0,5 μL |
2. Pripremite reakcijsku smjesu
| komponenta | Volumen po uzorku ili kontroli |
| 2× RT-qPCR pufer | 15 μL |
| Mješavina enzima (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
| Primeri i sonde | 1 μL |
Skladištenje i rok trajanja
-Komplet treba čuvati na -20± 5℃.Rok valjanosti je 12 mjeseci.
- Izbjegavajte ponovljene cikluse smrzavanja i odmrzavanja (<5 ciklusa).
