• facebook
  • linkedin
  • youtube
stranica_banner

Komplet Cell Direct RT qPCR—SYBR GREEN I Kompleti za izravnu lizu stanica spremni za qRT-PCR u jednom koraku

Opis kompleta:

Kat.br.DRT-01011/01012

Za stanični izravni RT-qPCR korištenjem 10-1.000.000 stanica,

i izvođenje RT-qPCR izravno iz stanica bez prethodnog pročišćavanja RNA.

Stanice se liziraju izravno kako bi se oslobodila RNA za RT-qPCR;sustav visoke tolerancije čini nepotrebnim pročišćavanje RNA i izravnu upotrebu staničnih lizata kao RNA predložaka za RT reakcije.Brzo i povoljno;visoka osjetljivost, snažna specifičnost i dobra stabilnost.

◮Jednostavno i učinkovito: s tehnologijom Cell Direct RT, uzorci RNA mogu se dobiti za samo 7 minuta.

Potreba za uzorkom je mala, može se testirati samo 10 stanica.

◮Visoka propusnost: može brzo otkriti RNA u stanicama uzgojenim u pločama s 384, 96, 24, 12, 6 jažica.

DNA Eraser može brzo ukloniti oslobođene genome, uvelike smanjiti utjecaj na naknadne eksperimentalne rezultate.

Optimizirani RT i qPCR sustav čini RT-PCR reverznu transkripciju u dva koraka učinkovitijom, a PCR specifičnijom i otpornijom na inhibitore RT-qPCR reakcije.


Pojedinosti o proizvodu

Oznake proizvoda

Pitanja

Preuzmite resurse

Opisi

Ovaj komplet koristi jedinstveni sustav pufera za lizu koji može brzo osloboditi RNA iz uzgojenih staničnih uzoraka za RT-qPCR reakcije, čime se eliminira dugotrajan i težak proces pročišćavanja RNA.Predložak RNA može se dobiti za samo 7 minuta.5×Direct RT Mix i 2×Direct qPCR Mix-SYBR reagensi koji se isporučuju u kompletu mogu brzo i učinkovito dobiti kvantitativne rezultate PCR-a u stvarnom vremenu.

5×Direct RT Mix i 2×Direct qPCR Mix-SYBR ima jaku toleranciju na inhibitore, a lizat uzoraka može se izravno koristiti kao obrazac za RT-qPCR.Ovaj komplet sadrži jedinstvenu Foregene reverznu transkriptazu visokog afiniteta RNA i Hot D-Taq DNA polimerazu, dNTP, MgCl2, reakcijski pufer, PCR optimizator i stabilizator.

Tehnički podaci

200×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns

Komponente kompleta

dio I

Međuspremnik CL

Foregene Protease Plus II

Međuspremnik ST

Dio II

DNK brisač

5× Direct RT Mix

2× Direct qPCR Mix-SYBR

50× ROX referentna boja

ddH2O bez RNaze

upute

Značajke i prednosti

Jednostavno i učinkovito: s tehnologijom Cell Direct RT, uzorci RNA mogu se dobiti za samo 7 minuta.

■ Potreba za uzorkom je mala, može se testirati samo 10 stanica.

■ Visoka propusnost: može brzo detektirati RNA u stanicama uzgojenim u pločama s 384, 96, 24, 12, 6 jažica.

■ DNA Eraser može brzo ukloniti oslobođene genome, uvelike smanjiti utjecaj na naknadne eksperimentalne rezultate.

■ Optimizirani RT i qPCR sustav čini RT-PCR reverznu transkripciju u dva koraka učinkovitijom, a PCR specifičnijom i otpornijom na inhibitore RT-qPCR reakcije.

Primjena kompleta

Područje primjene: kultivirane stanice.

- RNA oslobođena lizom uzorka: primjenjivo samo na RT-qPCR predložak ovog kompleta.

- Komplet se može koristiti u sljedeće svrhe: analiza ekspresije gena, verifikacija učinka utišavanja gena posredovanog siRNA, probir lijekova itd.

Dijagram

Cell Direct RT qPCR dijagram

Skladištenje i rok trajanja

Dio I ovog pribora treba čuvati na 4 ℃;Dio II treba čuvati na -20 ℃.

 Foregene Protease Plus II treba čuvati na 4℃, nemojte smrzavati na -20 ℃.

 Reagens 2×Direct qPCR Mix-SYBR treba pohraniti na -20po mraku;ako se često koristi, može se pohraniti i na 4℃ za kratkotrajno skladištenje (potrošiti unutar 10 dana).


  • Prethodna:
  • Sljedeći:

  • Načela dizajna početnica za PCR u stvarnom vremenu

    Forward Primer i Reverse Primer

    Za PCR u stvarnom vremenu, dizajn primera je vrlo važan.Primeri su povezani sa specifičnošću i učinkovitošću PCR amplifikacije i mogu se dizajnirati prema sljedećim načelima:

    Duljina primera: 18-30bp.

    GC sadržaj: 40-60%.

    Tm vrijednost: Softver za dizajn primera, kao što je Primer 5, može dati Tm vrijednost primera.Vrijednosti Tm uzvodno i nizvodno početnica trebaju biti što bliže.Također se može koristiti formula za izračun Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Prilikom izvođenja PCR-a, temperatura ispod vrijednosti Tm klica od 5 °C općenito se odabire kao temperatura žarenja (odgovarajuće povećanje temperature žarenja može povećati specifičnost PCR reakcije).

    Primeri i PCR proizvodi:

    Duljina produkta PCR amplifikacije primera dizajna poželjno je 100-150 bp.

    Dizajn temeljne premaze u sekundarnom strukturnom području predloška treba izbjegavati što je više moguće.

    Izbjegavajte stvaranje 2 ili više komplementarnih baza između 3' krajeva uzvodnih i nizvodnih početnica.

    Primer 3' terminalna baza ne može biti prisutna s 3 dodatna uzastopna G ili C.

    Sami primeri ne mogu imati komplementarne strukture, inače će se formirati struktura ukosnice koja utječe na PCR pojačanje.

    ATCG treba raspodijeliti što je ravnomjernije moguće u nizu početnica, a 3' terminalnu bazu treba izbjegavati jer T.

    Dodatak 1:Cell Direct RT-qPCR Kit dopunsko pakiranje komponenti

    1.Otopina za lizu stanica


    Otopina za lizu stanica

    Komponente kompleta

    (sustav za lizu s 24 jažice / jažica)

    DRT-01011-A1

    DRT-01011-A2

    100 T

    500 T

    Dioja

    Međuspremnik CL

    20 ml

    100 ml

    Foregene Protease Plus II

    400 μl

    1 ml × 2

    Međuspremnik ST

    1 ml × 2

    10 ml

    DioII

    DNK brisač

    400 μl

    1 ml × 2

    2.RT mješavina


    RT Mix

    Komponente kompleta

    (20 μl reakcijski sustav)

    DRT-01011-B1

    200 T

    5× Direct RT Mix

    800 μl

    ddH bez RNaze2O

    1,7 ml × 2

     

    3.qPCR mješavina


    qPCR mješavina

    Komponente kompleta

    (20 μl reakcijski sustav)

    DRT-01011-C1

    DRT-01011-C2

    200 T

    1000 T

    2× Direct qPCR Mix-SYBR

    1 ml × 2

    1,7 ml × 6

    50× ROX referentna boja

    40 μl

    200 μl

    ddH bez RNaze2O

    1,7 ml

    10 ml

    Priručnici s uputama:

    QuickEasyTM Cell Direct RT-qPCR Kit-SYBR Green I

    Ovdje napišite svoju poruku i pošaljite nam je