Lnc-RT Heroᵀᴹ I (s gDNase) (Super premiks za sintezu prvog lanca cDNA iz lncRNA)
Tehnički podaci
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (s gDNase) je sustav obrnute transkripcije posebno razvijen za lncRNA za brzo uklanjanje kontaminacije genomske DNA.5×gDNase Mix može brzo ukloniti preostali genom u RNK na 42°C tijekom 2 minute, učinkovito izbjegavajući interferenciju genoma na rezultate qPCR.
5×L-RT HeroTM Mix sadrži Foregene LncRNA reverznu transkriptazu koju je posebno razvio Foregene, a koja je nova vrsta reverzne transkriptaze posebno za lncRNA i druge duge RNA složene predloške, s jačim RNA afinitetom i većom učinkovitošću snimanja preokreta.Optimizirani sustav čini brzinu obrnute transkripcije bržom i može lako prepisati predloške RNA s visokim GC sadržajem i složenom sekundarnom strukturom.Sinteza prvog lanca cDNA može se završiti na 42°C za 15 minuta.
Komponente kompleta
| 5× gDNase mješavina |
| 5× L-RT HeroTM Mix |
| ddH2O bez RNaze |
| upute |
Značajke i prednosti
■Učinkovita sposobnost uklanjanja gDNA, koja može ukloniti gDNA u predlošku unutar 2 minute.
■ Može učinkovito preokrenuti transkripciju lncRNA.Kada se proizvod obrnute transkripcije podvrgne qPCR-u, vrijednost Ct niža je od one kod konvencionalnog sustava obrnute transkripcije.
■ Učinkovit sustav obrnute transkripcije, potrebno je samo 15 minuta da se dovrši sinteza prvog lanca cDNA.
■ Složeni predlošci: predlošci s visokim GC sadržajem i složenom sekundarnom strukturom također se mogu preokrenuti uz visoku učinkovitost.
■ Visokoosjetljivi sustav obrnute transkripcije, predlošci na razini pg također mogu dobiti cDNA visoke kvalitete.
■ Sustav obrnute transkripcije ima visoku toplinsku stabilnost, optimalna reakcijska temperatura je 42℃, i još uvijek ima dobre performanse obrnute transkripcije na 50℃.
Primjena kompleta
lncRNA relativna kvantitativna analiza.
Apsolutna kvantitativna analiza lncRNA.
Može brzo i precizno analizirati RNK u tragovima kao što je RNK virus.
Reverzna transkripcija RNA šablona s visokim sadržajem GC ili složenom sekundarnom strukturom.
Tijek rada
Skladištenje i rok trajanja
Komplet treba čuvati na -20°C. Proizvod čuvati u hladnjaku stalne temperature na -20°C odmah po primitku.Ako su uvjeti skladištenja prikladni, proizvod neće pogoršati performanse tijekom razdoblja valjanosti od 1 godine.
Vodič za analizu problema
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-specifično pojačanje
1. Nerazuman dizajn temeljnog premaza
Preporuka: Dizajnirajte temeljne premaze prema načelima dizajna primera.
2. Ostaci genoma.
Prijedlog: Provjerite je li temperatura reakcije uklanjanja gDNA u prvom koraku 42°C, a vrijeme reakcije također se može produžiti na 5 minuta.
Nema signala pojačanja pomoću RT-qPCR
1. RNK se razgrađuje.
Preporuka: Materijal za ekstrakciju RNA treba biti što svježiji, a treba koristiti RNA visoke kvalitete i visoke čistoće.
2. RNA sadrži inhibitore.
Preporuka: Inhibitori obrnute transkripcije općenito uključuju SDS, gvanidinske soli, EDTA, itd. Preporuča se isprati talog RNA sa 70% etanolom kako bi se uklonili inhibitori.
3. Pitanja dizajna primera.
Preporuka: Prema principu dizajna temeljnog premaza, redizajnirajte temeljne premaze za pregled.
Ciljna traka pojavljuje se u praznoj kontroli
1. Kontaminacija radnih alata ili reagensa.
Preporuka: Svi reagensi ili oprema za eksperiment trebaju biti autoklavirani.Budite pažljivi i nježni pri rukovanju kako biste spriječili da uzorci DNK budu usisani u pipetu ili proliveni iz epruvete centrifuge.
2. Do kontaminacije je došlo tijekom pripreme PCR reakcijskog sustava.
Preporuka: Poduzmite potrebne mjere opreza prilikom rukovanja, kao što su: nošenje rukavica od lateksa, korištenje vrhova filtera.Koristite Real Time PCR Mix u sustavu otpornom na kontaminaciju.
3. Prajmeri su degradirani.
Prijedlog: Upotrijebite SDS-PAGE elektroforezu da otkrijete jesu li početnice degradirane i zamijenite ih novim početnicama za pokuse otkrivanja fluorescencije.
Upute za uporabu:
