• facebook
  • linkedin
  • youtube
stranica_banner

PCR u stvarnom vremenu Easyᵀᴹ-Taqman

Opis kompleta:

Jednostavno—2× PCR mješavina za smanjenje eksperimentalne pogreške i vremena rada

Specifični—optimizirani pufer i Taq enzim za vrući početak mogu spriječiti nespecifično pojačanje i stvaranje dimera početnika

Visoka osjetljivost—može otkriti niske kopije predloška

Dobra svestranost—kompatibilan s većinom kvantitativnih PCR instrumenata u stvarnom vremenu

foregene snaga


Pojedinosti o proizvodu

Oznake proizvoda

Pitanja

Opisi kompleta

2X pravi PCR jednostavanTMMix-Taqman pruža Real Time PCR EasyTM-Taqman kit je novi sustav premiksa koji koristi specifične fluorescentne sonde za reakcije amplifikacije PCR u stvarnom vremenu, što može uvelike poboljšati specifičnost proizvoda i osjetljivost reakcije.ROX se isporučuje kao unutarnja kontrolna boja.

2X pravi PCR jednostavanTMMix-Taqman sadrži Foregene jedinstvenu Taq DNA polimerazu za vrući početak.U usporedbi s običnim Taq enzimima, ima prednosti visoke učinkovitosti pojačanja, snažne specifične sposobnosti pojačanja i niske stope neusklađenosti.Može smanjiti nespecifično pojačanje i poboljšati točnost PCR-a.

Tehnički podaci

Jednostavan PCR u stvarnom vremenuTM-Taqman

Sastav kompleta (sustav od 20 μl)

QP-01021

QP-01022

QP-01023

QP-01024

200T

500T

1000T

2000T

Pravi PCRLakoTMMiješati-Taqman

1 ml ×2

1.7 ml ×3

1.7 ml ×6

1.7 ml ×12

20×ROX referentna boja

200 μl

0,5ml

1 ml

1 ml × 2

ddH bez DNaze2O

1,7 ml

1.7 ml ×2

10 ml

20 ml

Iuputa

1

1

1

1

Značajke i prednosti

■ Jednostavno—2X PCR mješavina za smanjenje eksperimentalne pogreške i vremena rada

■ Specifičan—optimizirani pufer i Taq enzim za vrući početak mogu spriječiti nespecifično pojačanje i stvaranje dimera početnika

■ Visoka osjetljivost—može otkriti male kopije predloška

■ Dobra svestranost—kompatibilan s većinom kvantitativnih PCR instrumenata u stvarnom vremenu

Primjena kompleta

qPCR analiza

Tijek rada

RT PCR-Taqman
RT PCR-Taqman grafika

Grafički

Skladištenje i rok trajanja

Ovaj komplet treba čuvati dalje od svjetlosti i treba ga čuvati na -20 ℃.Ako se često koristi, također se može čuvati na 4 ℃ kratko vrijeme (10 dana).


  • Prethodna:
  • Sljedeći:

  • Nema pojačanja signala

    1. Taq DNA polimeraza u kompletu gubi svoju aktivnost zbog nepravilnog skladištenja ili isteka roka trajanja kompleta.
    Preporuka: Provjerite uvjete skladištenja kompleta;ponovno dodajte odgovarajuću količinu Taq DNA polimeraze u PCR sustav ili kupite novi Real Time PCR komplet za povezane eksperimente.

    2. Postoji mnogo inhibitora Taq DNA polimeraze u DNA šabloni.
    Prijedlog: Ponovo pročistite predložak ili smanjite količinu korištenog predloška.

    3. Koncentracija Mg2+ nije prikladna.
    Preporuka: Koncentracija Mg2+ u 2× Real PCR mješavini koju nudimo je 3,5 mM.Međutim, za neke posebne primere i predloške, koncentracija Mg2+ može biti veća.Stoga možete izravno dodati MgCl2 kako biste optimizirali koncentraciju Mg2+.Preporuča se povećanje Mg2+ za 0,5 mM svaki put radi optimizacije.

    4. Uvjeti PCR amplifikacije nisu prikladni, a slijed početnica ili koncentracija nisu odgovarajući.
    Prijedlog: potvrdite ispravnost slijeda početnice i da početnica nije degradirana;ako signal pojačanja nije dobar, pokušajte sniziti temperaturu žarenja i odgovarajuće prilagoditi koncentraciju primera.

    5. Količina predloška je premala ili prevelika.
    Preporuka: Izvršite gradijent linearizacije predloška i odaberite koncentraciju predloška s najboljim PCR učinkom za PCR eksperiment u stvarnom vremenu.

    NTC ima previsoku vrijednost fluorescencije

    1. Kontaminacija reagensa uzrokovana tijekom rada.
    Preporuka: Zamijenite novim reagensima za PCR eksperimente u stvarnom vremenu.

    2. Do kontaminacije je došlo tijekom pripreme PCR reakcijskog sustava.
    Preporuka: Poduzmite potrebne zaštitne mjere tijekom rada, kao što su: nošenje rukavica od lateksa, korištenje vrha pipete s filtrom itd.

    3. Početnice se razgrađuju, a razgradnja početnica će uzrokovati nespecifično pojačanje.
    Prijedlog: Upotrijebite SDS-PAGE elektroforezu da otkrijete jesu li početnice degradirane i zamijenite ih novim početnicama za PCR eksperimente u stvarnom vremenu.

    Primer dimera ili nespecifična amplifikacija

    1. Koncentracija Mg2+ nije prikladna.
    Preporuka: Koncentracija Mg2+ u mješavini 2× Real PCR EasyTM koju nudimo je 3,5 mM.Međutim, za neke posebne primere i predloške, koncentracija Mg2+ može biti veća.Stoga možete izravno dodati MgCl2 kako biste optimizirali koncentraciju Mg2+.Preporuča se povećanje Mg2+ za 0,5 mM svaki put radi optimizacije.

    2. Temperatura PCR žarenja je preniska.
    Prijedlog: Povećajte temperaturu žarenja PCR-a za 1 ℃ ili 2 ℃ svaki put.

    3. PCR proizvod je predug.
    Preporuka: Duljina proizvoda PCR u stvarnom vremenu trebala bi biti između 100-150 bp, ne više od 500 bp.

    4. Primeri se razgrađuju, a razgradnja početnica će dovesti do pojave specifične amplifikacije.
    Prijedlog: Upotrijebite SDS-PAGE elektroforezu da otkrijete jesu li početnice degradirane i zamijenite ih novim početnicama za PCR eksperimente u stvarnom vremenu.

    5. Sustav PCR nije ispravan ili je sustav premali.
    Prijedlog: PCR reakcijski sustav je premalen uzrokovat će smanjenje točnosti detekcije.Najbolje je koristiti reakcijski sustav koji preporučuje kvantitativni PCR instrument za ponovno izvođenje PCR eksperimenta u stvarnom vremenu.

    Loša ponovljivost kvantitativnih vrijednosti

    1. Instrument je u kvaru.
    Prijedlog: Mogu postojati pogreške između svake PCR rupe instrumenta, što rezultira slabom obnovljivošću tijekom upravljanja temperaturom ili detekcije.Provjerite prema uputama odgovarajućeg instrumenta.

    2. Čistoća uzorka nije dobra.
    Preporuka: Nečisti uzorci dovest će do loše ponovljivosti eksperimenta, što uključuje čistoću šablona i primera.Najbolje je ponovno pročistiti predložak, a početnice je najbolje pročistiti SDS-PAGE.

    3. Vrijeme pripreme i čuvanja PCR sustava je predugo.
    Prijedlog: Koristite Real Time PCR sustav za PCR eksperiment odmah nakon pripreme i ne ostavljajte ga predugo.

    4. Uvjeti PCR amplifikacije nisu prikladni, a slijed početnica ili koncentracija nisu odgovarajući.
    Prijedlog: potvrdite ispravnost slijeda početnice i da početnica nije degradirana;ako signal pojačanja nije dobar, pokušajte sniziti temperaturu žarenja i odgovarajuće prilagoditi koncentraciju primera.

    5. Sustav PCR nije ispravan ili je sustav premali.
    Prijedlog: PCR reakcijski sustav je premalen uzrokovat će smanjenje točnosti detekcije.Najbolje je koristiti reakcijski sustav koji preporučuje kvantitativni PCR instrument za ponovno izvođenje PCR eksperimenta u stvarnom vremenu.

    Ovdje napišite svoju poruku i pošaljite nam je