Direct RT-qPCR komplet
Opis kompleta:
◮ Direct RT-qPCR Kit, koji koristi Foreasy reverznu transkriptazu i Foreasy HS Taq DNA polimerazu koju razvija Foregene, s jedinstvenim reakcijskim puferom, čini ovaj komplet snažnom otpornošću i kompatibilnošću, a može izravno testirati reakciju koristeći Foregene Lysis sustav kao predložak.Ovaj se komplet može primijeniti za razvoj kompleta za otkrivanje nukleinske kiseline COVID-19 i drugih patogenih bakterija za razvoj kompleta za otkrivanje nukleinske kiseline.
Opis
Direct RT-qPCR Kit pruža zasebno pakirani RT-qPCR pufer i visoko učinkovit enzimmješavina (Taq、M-MLV、RI), što ga čini prikladnim za stvaranje pozadinskih kompleta i sustavapodešavanje, unutar jednostavne provjere.
Tehnički podaci
500T, 50.000T
Komponente kompleta
| Sadržaj kompleta (20 μL reakcijski sustav) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50 000 T | |
| Izravna mješavina enzima | 500 μL×1 | 50 mL×1 |
| 2× izravni RT-qPCR međuspremnik | 1 mL×5 | 500 mL×1 |
| Uputa | 1 | 1 |
Radni koraci
Prije pripreme reagensa, sve reagense u kompletu treba otopiti na sobnoj temperaturi i lagano promiješati.
A: Pripremiti of predložak i reagens
1. Pripremite pripremljeni RNA predložak (preporučuje se upotreba Foregene Total RNA Isolation Kit serije kompleta za izdvajanje i pročišćavanje RNA predloška) ili proizvoda za krekiranje uzorka (preporučuje se korištenje Foregene Lysis sustava), specifičnih primera (10 μM) i drugih relevantnih potrošnih materijala, instrumenta.
2. Stavite 2× izravni RT-qPCR pufer, ddH2O bez RNaze i 20× ROX referentnu boju (ako je'je potrebno) u kutiju s ledom, čineći da se prirodno tope i lagano miješaju.
B: Pripremiti of RT-qPCR sustav
Stol 1 : Pripremiti of RT-qPCR ssustav
| komponenta | Volumen | Konačna koncentracija |
| 2× izravni RT-qPCR međuspremnik | 10 μL | 1× |
| Izravna mješavina enzima | 1μL | |
| Forward Primer (10 μM) | 0,8 μL | 50-900 nM |
| Obrnuti primer (10 μM) | 0,8 μL | 50-900 nM |
| Sonda (4 μM) | 1μL | 200 nM |
| Predložak (RNA ili lizat) | X μL | |
| 20×ROX referentna boja | - | 1* |
| RNaze-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Ukupni volumen | 20μL |
C: set the RT-qPCR reakcija program
Stol 2 : RT-qPCR reagiration program postavljanje (za primjer: dva-korak metoda)
| Korak | Temperatura | Vrijeme | Ciklusi | Sadržaj | |
| 1 | 50 ℃ | 15 min | 1* | 1 | Obrnuta transkripcija |
| 2 | 95 ℃ | 1 minuta | 1 | Preddenaturacija | |
| 3 | 95 ℃ | 10 sek | 40-45 (prikaz, ostalo). | Denaturacija | |
| 60 ℃ | 30 sekundi 2* | Žarenje/proširenje | |||
Skladištenje i rok trajanja
-Komplet treba čuvati na -20± 5℃.Rok valjanosti je 12 mjeseci.
- Izbjegavajte ponovljene cikluse smrzavanja i odmrzavanja (<5 ciklusa).
