• facebook
  • linkedin
  • youtube
stranica_banner

Foreasy Taq DNA polimeraza

Opis kompleta:

Visoka specifičnost: enzim ima određenu aktivnost vrućeg pokretanja.

Brzo pojačanje: 10 sek/kb.

Vrlo prilagodljivi predložak: može se koristiti za učinkovito pojačavanje GC Visokovrijednih, različitih DNK predložaka koje je teško umnožiti.

Snažna vjernost: obični Taq enzim 6 puta.

Jaka toplinska stabilnost: Može se staviti na 37 °C tjedan dana i održava više od 90% aktivnosti.

foregene snaga


Pojedinosti o proizvodu

Oznake proizvoda

Pitanja

Opis

Foreasy Taq DNA polimeraza je novi Taq enzim ekspresiran u Escherichia coli inženjering bakterija tehnologijom rekombinacije gena.Sam enzim ima određenu aktivnost vrućeg pokretanja i može se koristiti za konvencionalni PCR i qPCR;ima aktivnost 5'→3' DNA polimeraze i aktivnost 5'→3' egzonukleaze, ali nema aktivnost 3'→5' egzonukleaze.

Komponente kompleta

komponenta

IM-01011 IM-01012 IM-01013
Foreasy Taq DNA polimeraza(5 U/μL)  5000 U (1 mL)  50 KU (10 ml)  500 KU (100 ml)
2× Taq reakcijski pufer  25 mL × 5  250 mL × 5  500 mL × 25

Značajke i prednosti

- Visoka specifičnost: Enzim ima određenu aktivnost vrućeg pokretanja.

- Brzo pojačanje: 10 s/kb.

- Visoko prilagodljivi predložak: može se koristiti za učinkovito pojačavanje GC Visoke vrijednosti, različiti DNK predlošci koje je teško pojačati.

- Jaka vjernost: obični Taq enzim 6 puta.

- Jaka toplinska stabilnost: Može se staviti na 37 °C tjedan dana i održava više od 90% aktivnosti

Primjena kompleta

Razni PCR/qPCR sustavi i direktni PCR sustavi

PCR amplifikacija fragmenata DNA

Označavanje DNA

Sekvenciranje DNA

PCR A-tailed

U Definicija

1U: Količina enzima potrebna za ugradnju 10 nmol deoksinukleotida u tvar netopljivu u kiselini korištenjem aktivirane DNA sperme lososa kao uzorka/primera tijekom 30 minuta na 74°C.

Stanje reakcije

Temperatura Vrijeme Ciklus
37°C 5 minuta 1
94°C 5 minuta 1
94°C 10 sekundi  

35

60°C 10 sekundi
72°C 20 s/kb
72°C 2 minute 1

Skladištenje

-20 ± 5 °C tijekom 2 godine ili na -80 °C za dugotrajno skladištenje.


  • Prethodna:
  • Sljedeći:

  • Nema pojačanja signala

    1. Taq DNA polimeraza u kompletu gubi svoju aktivnost zbog nepravilnog skladištenja ili isteka roka trajanja kompleta.
    Preporuka: Provjerite uvjete skladištenja kompleta;ponovno dodajte odgovarajuću količinu Taq DNA polimeraze u PCR sustav ili kupite novi Real Time PCR komplet za povezane eksperimente.

    2. Postoji mnogo inhibitora Taq DNA polimeraze u DNA šabloni.
    Prijedlog: Ponovo pročistite predložak ili smanjite količinu korištenog predloška.

    3. Koncentracija Mg2+ nije prikladna.
    Preporuka: Koncentracija Mg2+ u 2× Real PCR mješavini koju nudimo je 3,5 mM.Međutim, za neke posebne primere i predloške, koncentracija Mg2+ može biti veća.Stoga možete izravno dodati MgCl2 kako biste optimizirali koncentraciju Mg2+.Preporuča se povećanje Mg2+ za 0,5 mM svaki put radi optimizacije.

    4. Uvjeti PCR amplifikacije nisu prikladni, a slijed početnica ili koncentracija nisu odgovarajući.
    Prijedlog: potvrdite ispravnost slijeda početnice i da početnica nije degradirana;ako signal pojačanja nije dobar, pokušajte sniziti temperaturu žarenja i odgovarajuće prilagoditi koncentraciju primera.

    5. Količina predloška je premala ili prevelika.
    Preporuka: Izvršite gradijent linearizacije predloška i odaberite koncentraciju predloška s najboljim PCR učinkom za PCR eksperiment u stvarnom vremenu.

    NTC ima previsoku vrijednost fluorescencije

    1. Kontaminacija reagensa uzrokovana tijekom rada.
    Preporuka: Zamijenite novim reagensima za PCR eksperimente u stvarnom vremenu.

    2. Do kontaminacije je došlo tijekom pripreme PCR reakcijskog sustava.
    Preporuka: Poduzmite potrebne zaštitne mjere tijekom rada, kao što su: nošenje rukavica od lateksa, korištenje vrha pipete s filtrom itd.

    3. Početnice se razgrađuju, a razgradnja početnica će uzrokovati nespecifično pojačanje.
    Prijedlog: Upotrijebite SDS-PAGE elektroforezu da otkrijete jesu li početnice degradirane i zamijenite ih novim početnicama za PCR eksperimente u stvarnom vremenu.

    Primer dimera ili nespecifična amplifikacija

    1. Koncentracija Mg2+ nije prikladna.
    Preporuka: Koncentracija Mg2+ u mješavini 2× Real PCR EasyTM koju nudimo je 3,5 mM.Međutim, za neke posebne primere i predloške, koncentracija Mg2+ može biti veća.Stoga možete izravno dodati MgCl2 kako biste optimizirali koncentraciju Mg2+.Preporuča se povećanje Mg2+ za 0,5 mM svaki put radi optimizacije.

    2. Temperatura PCR žarenja je preniska.
    Prijedlog: Povećajte temperaturu žarenja PCR-a za 1 ℃ ili 2 ℃ svaki put.

    3. PCR proizvod je predug.
    Preporuka: Duljina proizvoda PCR u stvarnom vremenu trebala bi biti između 100-150 bp, ne više od 500 bp.

    4. Primeri se razgrađuju, a razgradnja početnica će dovesti do pojave specifične amplifikacije.
    Prijedlog: Upotrijebite SDS-PAGE elektroforezu da otkrijete jesu li početnice degradirane i zamijenite ih novim početnicama za PCR eksperimente u stvarnom vremenu.

    5. Sustav PCR nije ispravan ili je sustav premali.
    Prijedlog: PCR reakcijski sustav je premalen uzrokovat će smanjenje točnosti detekcije.Najbolje je koristiti reakcijski sustav koji preporučuje kvantitativni PCR instrument za ponovno izvođenje PCR eksperimenta u stvarnom vremenu.

    Loša ponovljivost kvantitativnih vrijednosti

    1. Instrument je u kvaru.
    Prijedlog: Mogu postojati pogreške između svake PCR rupe instrumenta, što rezultira slabom obnovljivošću tijekom upravljanja temperaturom ili detekcije.Provjerite prema uputama odgovarajućeg instrumenta.

    2. Čistoća uzorka nije dobra.
    Preporuka: Nečisti uzorci dovest će do loše ponovljivosti eksperimenta, što uključuje čistoću šablona i primera.Najbolje je ponovno pročistiti predložak, a početnice je najbolje pročistiti SDS-PAGE.

    3. Vrijeme pripreme i čuvanja PCR sustava je predugo.
    Prijedlog: Koristite Real Time PCR sustav za PCR eksperiment odmah nakon pripreme i ne ostavljajte ga predugo.

    4. Uvjeti PCR amplifikacije nisu prikladni, a slijed početnica ili koncentracija nisu odgovarajući.
    Prijedlog: potvrdite ispravnost slijeda početnice i da početnica nije degradirana;ako signal pojačanja nije dobar, pokušajte sniziti temperaturu žarenja i odgovarajuće prilagoditi koncentraciju primera.

    5. Sustav PCR nije ispravan ili je sustav premali.
    Prijedlog: PCR reakcijski sustav je premalen uzrokovat će smanjenje točnosti detekcije.Najbolje je koristiti reakcijski sustav koji preporučuje kvantitativni PCR instrument za ponovno izvođenje PCR eksperimenta u stvarnom vremenu.

    Ovdje napišite svoju poruku i pošaljite nam je