Komplet za izolaciju virusne DNA i RNA Kompleti za pripremu za pročišćavanje ekstrakcije virusne DNA i RNA
Tehnički podaci
50 priprema, 200 priprema
Viral RNA Nucleic acid Purification Extraction Isolation Kit koristi spin kolonu i formulu razvijenu od strane Foregene, koja može učinkovito ekstrahirati virusnu RNA visoke čistoće i kvalitete iz uzoraka kao što su plazma, serum, tjelesne tekućine bez stanica i supernatant stanične kulture.Komplet posebno dodaje linearni akrilamid, koji može lako uhvatiti male količine RNK iz uzoraka.RNA-Only Column može učinkovito vezati RNA.Komplet može obraditi veliki broj uzoraka u isto vrijeme.
Cijeli komplet ne sadrži RNazu, tako da se pročišćena RNK neće razgraditi.Pufer viRW1 i pufer viRW2 mogu osigurati da dobivena virusna nukleinska kiselina ne sadrži proteine, nukleaze ili druge nečistoće, što se može koristiti izravno za nizvodne eksperimente molekularne biologije.
Komponente kompleta
| Linearni akrilamid |
| Međuspremnik DRL |
| Međuspremnik RW1, međuspremnik RW2 |
| ddH bez RNaze2O |
| DNA/RNA stupac |
| upute |
Značajke i prednosti
■ Rad na sobnoj temperaturi (15-25 ℃) tijekom cijelog procesa, bez ledene kupelji i centrifugiranja na niskoj temperaturi.
■ Kompletan komplet Bez RNaze, nema potrebe brinuti o degradaciji RNK.
■ Visoki prinos nukleinske kiseline: kolona samo za DNA/RNA i jedinstvena formula mogu učinkovito pročistiti DNA i RNA.
■ Veliki kapacitet obrade uzoraka: svaki put se može obraditi do 200 μl uzoraka.
■ Velika brzina: jednostavan za rukovanje i može se završiti u roku od 20 minuta.
■ Sigurnost: nije potreban organski reagens.
■ Visoka kvaliteta: pročišćeni RNA fragmenti su visoke čistoće, bez proteina i drugih nečistoća i mogu zadovoljiti razne daljnje eksperimentalne primjene.
Primjena kompleta
Pogodan je za ekstrakciju i pročišćavanje virusne nukleinske kiseline u uzorcima kao što su plazma, serum, tjelesne tekućine bez stanica i supernatant stanične kulture.
Tijek rada
Dijagram
Skladištenje i rok trajanja
■ Ovaj komplet može se čuvati 24 mjeseca u suhim uvjetima na sobnoj temperaturi (15-25 ℃);ako je potrebno čuvati dulje vrijeme, može se čuvati na 2–8 ℃.
■ Otopina linearnog akrilamida može se čuvati na sobnoj temperaturi 7 dana;nakon primitka kompleta izvadite ga i čuvajte na -20°C.
■ Nakon dodavanja linearnog akrilamida u pufer DRL, može se čuvati na 2-8°C do 48 sati.Molimo koristite gotovo rješenje.
Vodič za analizu problema
Slijedi analiza problema s kojima se može susresti u ekstrakciji virusne DNA/RNA, u nadi da će biti od pomoći u vašim eksperimentima.Osim toga, za druge eksperimentalne ili tehničke probleme, osim uputa za rad i analize problema, imamo posvećenu tehničku podršku koja će vam pomoći.Ukoliko imate bilo kakvih potreba, obratite nam se na broj: 028-83360257 ili na e-mail:
Tech@foregene.com.
Nema ekstrakcije nukleinske kiseline ili nizak prinos nukleinske kiseline
Obično postoje mnogi čimbenici koji utječu na učinkovitost oporavka, kao što su: sadržaj nukleinske kiseline u uzorku, metoda rada, volumen elucije itd.
Analiza uobičajenih uzroka:
1. Tijekom postupka provedena je ledena kupelj ili centrifugiranje na niskoj temperaturi (4°C).
Prijedlog: Radite na sobnoj temperaturi (15-25°C) tijekom cijelog procesa, nemojte koristiti ledenu kupku i centrifugiranje na niskoj temperaturi.
2. Uzorak je bio nepropisno pohranjen ili je uzorak bio pohranjen predugo.
Preporuka: Čuvajte uzorke na -80°C i izbjegavajte ponovno zamrzavanje i odmrzavanje;pokušajte koristiti svježe prikupljene uzorke za ekstrakciju nukleinske kiseline.
3. Nedovoljna liza uzorka.
Preporuka: Provjerite jesu li uzorak i radna otopina za lizu temeljito promiješani i inkubirani na sobnoj temperaturi (15-25°C) 10 minuta.
4. Netočno dodavanje eluensa.
Prijedlog: Provjerite je li ddH2O bez RNaze dodan kap po kap na sredinu membrane kolone za pročišćavanje i nemojte ga ispustiti na prsten kolone za pročišćavanje.
5. Točan volumen apsolutnog etanola nije dodan u pufer RW2.
Prijedlozi: Slijedite upute, dodajte točan volumen apsolutnog etanola u pufer RW2 i dobro promiješajte prije upotrebe kompleta.
6. Neodgovarajući volumen uzorka.
Prijedlog: 200 µl uzorka se obrađuje za svakih 500 µl pufera DRL.Pretjerana obrada uzorka rezultirat će manjim prinosom ekstrakcije nukleinske kiseline.
7. Neodgovarajući volumen eluacije ili nepotpuna elucija.
Preporuka: Volumen eluensa kolone za pročišćavanje je 30-50μl;ako učinak eluiranja nije zadovoljavajući, preporučuje se produžiti vrijeme na sobnoj temperaturi nakon dodavanja prethodno zagrijanog ddH2O bez RNaze, na primjer 5-10 min.
8. Etanol ostaje na koloni nakon ispiranja puferom RW2.
Prijedlog: Ako etanol ostane nakon centrifugiranja s puferom RW2 tijekom 2 minute, kolona se može staviti na sobnu temperaturu 5 minuta nakon centrifugiranja kako bi se u potpunosti uklonio zaostali etanol.
Pročišćena nukleinska kiselina se razgrađuje
Kvaliteta pročišćene nukleinske kiseline povezana je s očuvanjem uzorka, kontaminacijom RNazom, radom i drugim čimbenicima.Analiza uobičajenih uzroka:
1. Prikupljeni uzorci nisu pohranjeni na vrijeme.
Prijedlog: Ako se uzorak ne upotrijebi na vrijeme nakon uzimanja, odmah ga pohranite na -80°C na niskoj temperaturi.Za ekstrakciju RNK pokušajte koristiti svježe prikupljene uzorke.
2. Prikupite uzorke te ih više puta zamrznite i odmrznite.
Prijedlog: Izbjegavajte zamrzavanje i odmrzavanje (ne više od jednom) tijekom prikupljanja i pohranjivanja uzoraka, inače će se smanjiti prinos nukleinske kiseline.
3. RNaza se unosi u operacijskoj sali ili se ne nose jednokratne rukavice, maske i sl.
Preporuka: Eksperimente ekstrakcije RNK najbolje je izvoditi u zasebnoj sobi za operacije RNK, a laboratorijski stol treba očistiti prije eksperimenta.
Tijekom eksperimenta nosite jednokratne rukavice i maske kako biste u najvećoj mjeri izbjegli degradaciju RNK uzrokovanu uvođenjem RNaze.
4. Reagens je kontaminiran RNazom tijekom upotrebe.
Preporuka: Zamijenite novim kompletom za izolaciju virusne DNA/RNA za povezane pokuse.
5. Centrifugalne epruvete i vrhovi pipeta koji se koriste za manipulaciju RNK kontaminirani su RNazom.
Prijedlog: Provjerite jesu li epruvete za centrifugiranje, vrhovi pipeta, pipete itd. koji se koriste za ekstrakciju RNA bez RNaze.
Pročišćena nukleinska kiselina utječe na nizvodne eksperimente
DNA i RNA pročišćene kolonom za pročišćavanje, ako su sadržaj iona soli i proteina previsoki, to će utjecati na nizvodne eksperimente, kao što su: PCR pojačanje, reverzna transkripcija, itd.
1. Isprane DNA i RNA imaju zaostale ione soli.
Prijedlog: Provjerite je li točan volumen apsolutnog etanola dodan u pufer RW2 i dvaput operite kolonu za pročišćavanje pri brzini centrifugiranja navedenoj u uputama za rad;Provedite centrifugiranje kako biste smanjili kontaminaciju ionima soli.
2. Isprane DNA i RNA imaju ostatke etanola.
Prijedlog: Nakon potvrde ispiranja puferom RW2, izvedite centrifugiranje prazne epruvete pri brzini centrifugiranja navedenoj u uputama za rad;ako još uvijek ima ostataka etanola, možete centrifugirati praznu epruvetu i zatim je staviti na sobnu temperaturu na 5 minuta kako biste uklonili ostatke etanola u najvećoj mjeri.
Priručnici s uputama:
Priručnik s uputama za komplet za izolaciju virusne DNK i RNK
