Uvod:

RNA, znanstveni naziv ribonukleinska kiselina, a skraćenica dolazi od RiboNucleic Acid, vrsta je nukleinske kiseline koja nastaje povezivanjem najmanje desetaka ribonukleotida preko fosfodiesterskih veza.

Pretpostavka istraživanja RNK je ekstrakcija ukupne RNK bez zagađenja, a osnovni princip ekstrakcije RNK može se ugrubo sažeti na sljedeći način:

1. Najprije poremeti stanice

2. Zatim uklonite makromolekularne nečistoće (proteine, lipide, DNA, itd.)

3. Konačno, RNA se taloži uz uklanjanje soli i organskih otapala i daljnje pročišćavanje RNA

Prošlost i sadašnjost metode ekstrakcije

Prva generacija metode ekstrakcije RNK je metoda taloženja TRIzol (korišteni reagensi uključuju gvanidin izotiocijanat, fenol, kloroform itd.) koju su izumili djed po imenu Piotr Chomczynski i baka Nicoletta Sacchi, jer ovaj izum omogućuje ekstrakciju RNK brzo i jednostavno, od tada je započeo uzlet istraživanja RNK.

Kasnije je djed prodao ovaj patent Invitrogenu, a Invitrogen je promovirao ovu metodu u svijetu i postala široko korištena metoda.

Kasnije je Invitrogen kupio Thermo!

Reprezentativni proizvod: Invitrogenov TRIzol reagens

Međutim, TRIzol metoda taloženja zahtijeva višestruko taloženje i ekstrakciju RNA, a korišteni reagensi su toksični i treba im dugo vremena za rad.

Stoga je nastala druga generacija metode pročišćavanja enzima na stupcu, koja koristi membranu od silika gela kao specifični materijal za adsorpciju nukleinske kiseline kako bi se maksimizirao oporavak RNK u uzorku uz uklanjanje drugih nečistoća.

Metoda druge generacije pojednostavljuje rad na temelju stabilnih performansi, smanjuje faktor rizika i poboljšava učinkovitost ekstrakcije RNK.

Reprezentativni proizvodi: QIAGEN RNeasy i većina domaćih proizvoda

Međutim, i metode prve i druge generacije zahtijevaju upotrebu DNaze za uklanjanje kontaminacije DNK, što donosi neke neugodnosti kasnijim eksperimentima.Preostala DNAza će smanjiti učinkovitost reverzne transkripcije i smanjiti sintezu prvog lanca cDNA, čime će utjecati na točnost rezultata.

Stoga je metoda ekstrakcije treće generacije optimizirana na temelju druge generacije.Pokus ne treba dodavati nikakve enzime, a RNA se lako može dobiti sa samo dva stupca.

Stupac 1: Stupac za čišćenje DNK za čišćenje DNK

Stupac 2: Stupac samo za RNA specifično adsorbira i oporavlja RNA

Takva jednostavna operacija ne samo da štedi vrijeme, već i olakšava rad nizvodnih eksperimenata!

Reprezentativni proizvodi: QIAGEN RNeasy Plus iForegeneSerijski proizvodi za pročišćavanje RNA

（RNeasy Plus）

（Foregene'sKomplet za izolaciju ukupne biljne RNK）

Tiho ti reci!Foregene's RNA kit također predstavlja RNase Eraser super jednostavan za korištenje, koji može u potpunosti ukloniti 400μg RNase na čvrstoj površini u 1 minuti, bez dodavanja toksičnih tvari u ljudsko tijelo!

slika1: Usporedna tablica operativnog procesa

Proizvodi Foregene mogu dovršiti ekstrakciju RNK u samo dvije pjesme, nemojte učiniti druge ljubomornima na napredak vašeg eksperimenta!

slika2:Experimentalni rezultati usporedna tablica

Prva generacija (1: TRIzol)

Druga generacija (2: RNeasy od QIAGEN-a)

Treća generacija (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Foregene)

slika3: qPCR grafikon (graf krivulje pojačanja)

Prva generacija (zeleno znači TRIzol -, crveno znači TRIzol +)

Druga generacija (nebesko plava znači QIAGEN RNeasy-, crvena znači QIAGEN RNeasy +)

Treća generacija (plavo znači QIAGEN RNeasy plus, zeleno znači Foregene)

(Napomena: qPCR grafikon "-" označava da DNaza nije dodana i kontaminacija DNK nije uklonjena. Stoga je CT viši i rezultat nije točan; "+" označava da je DNaza dodana i kontaminacija DNK uklonjena, rezultat je točan)

Svaka tehnička nadogradnja znači da se rad eksperimenta razvija u jednostavnijem i korisniku prihvatljivijem smjeru.

Foregene ima za cilj pomoći većem broju znanstvenih istraživača uštedjeti vrijeme i troškove eksperimenta, dobiti visokokvalitetne eksperimentalne rezultate i zajednički stvoriti vrednija znanstvena istraživačka postignuća.