QuickEasyᵀᴹ PCR komplet u stvarnom vremenu-Taqman
Opisi
2× QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman osigurava QuickEasyTMKomplet za PCR u stvarnom vremenu-Taqman komplet je nova generacija sustava glavne mješavine dizajniranog za reakciju amplifikacije PCR u stvarnom vremenu pomoću specifičnih fluorescentnih sondi.Njegova jezgra Foregene HS Taq DNA polimeraza temelji se na modifikaciji protutijela, koristi se u kombinaciji s Foregene dodatno optimiziranim PCR sustavom, ima veću specifičnost i učinkovitost umnožavanja.U usporedbi s običnom PCR mješavinom, ima jaču sposobnost pojačanja i nižu stopu neslaganja.Može se koristiti u fluorescentnoj kvantitativnoj PCR reakciji kako bi se smanjilo nespecifično pojačanje i poboljšala točnost PCR-a.Može uvelike poboljšati specifičnost proizvoda i osjetljivost reakcije.U isto vrijeme, ROX je dostavljen kao interna referentna boja.
QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman kit ima širok opseg primjene na količinu predloška i može dobiti dobru standardnu krivulju u različitim kvantitativnim regijama i može točno kvantificirati i detektirati ciljne gene s dobrom ponovljivošću i visokom pouzdanošću.
Tehnički podaci
200 priprema,500 priprema,1000 priprema,2000. Pripreme
Komponente kompleta
QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman(20μlsustav) | ||||
Sadržaj kompleta | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
200 Preps | 500 Preps | 1000 Preps | 2000. Pripreme | |
2×BrzLakoTM Pravi PCR Miješati-Taqman | 1 mL×2 | 1,7 mL×3 | 1,7 mL×6 | 1,7 mL×12 |
20×ROX referentna boja | 200μL | 0,5 mL | 1 mL | 1 mL×2 |
ddH bez DNaze2O | 1,7 mL | 1,7 mL×2 | 10 mL | 20 mL |
AKO TI | 1komad | 1komad | 1komad | 1komad |
Značajke i prednosti
■ Jedinstveni sustav PCR optimizacije čini 2×QuickEasyTMPravi PCR Mix-Taqman više kompatibilan.
■ Hot-start Foregene HS Taq polimeraza ima veću učinkovitost pojačanja, veću osjetljivost pojačanja i veću specifičnost pojačanja.
■ 2× QuickEasyTM Real PCR Mix -Taqman koristi jedinstveni sustav koji je optimizirao Foregene za poboljšanje osjetljivosti i specifičnosti detekcije sonde specifične za sekvencu, koja se može koristiti za genotipizaciju i određivanje varijacije broja kopija i dobivanje točnih rezultata.
■ Ovaj proizvod dolazi s ROX internom referentnom bojom, koja se može koristiti za uklanjanje pozadine signala i pogreške signala između jažica, što je zgodno za korisnike za korištenje u različitim vrstama kvantitativnih PCR instrumenata.
Primjena kompleta
■ Fluorescencijski kvantitativni PCR za kvantitativnu analizu uzorka;
■ Ckonvencionalna PCR amplifikacija;
■ Može se koristiti za detekciju alela.
Skladištenje i rok trajanja
Komplet treba čuvati na -20°C u mraku;ako se često koristi, može se i kratkotrajno čuvati na 4°C (potrošiti unutar 10 dana).
Načela dizajna početnica za PCR u stvarnom vremenu
Forward Primer i Reverse Primer
Za PCR u stvarnom vremenu, dizajn primera je vrlo važan.Primeri su povezani sa specifičnošću i učinkovitošću PCR amplifikacije i mogu se dizajnirati prema sljedećim načelima:
Duljina primera: 18-30bp.
GC sadržaj: 40-60%.
Tm vrijednost: Softver za dizajn primera, kao što je Primer 5, može dati Tm vrijednost primera.Vrijednosti Tm uzvodno i nizvodno početnica trebaju biti što bliže.Također se može koristiti formula za izračun Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Prilikom izvođenja PCR-a, temperatura ispod vrijednosti Tm klica od 5 °C općenito se odabire kao temperatura žarenja (odgovarajuće povećanje temperature žarenja može povećati specifičnost PCR reakcije).
Primeri i PCR proizvodi:
Duljina produkta PCR amplifikacije primera dizajna poželjno je 100-150 bp.
Dizajn temeljne premaze u sekundarnom strukturnom području predloška treba izbjegavati što je više moguće.
Izbjegavajte stvaranje 2 ili više komplementarnih baza između 3' krajeva uzvodnih i nizvodnih početnica.
Primer 3' terminalna baza ne može biti prisutna s 3 dodatna uzastopna G ili C.
Sami primeri ne mogu imati komplementarne strukture, inače će se formirati struktura ukosnice koja utječe na PCR pojačanje.
ATCG treba raspodijeliti što je ravnomjernije moguće u nizu početnica, a 3' terminalnu bazu treba izbjegavati jer T.
Dodatak 1:Cell Direct RT-qPCR Kit dopunsko pakiranje komponenti
1.Otopina za lizu stanica
| |||
Komponente kompleta (sustav za lizu s 24 jažice / jažica) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Dioja | Međuspremnik CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Međuspremnik ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
DioII | DNK brisač | 400 μl | 1 ml × 2 |
2.RT mješavina
| |
Komponente kompleta (20 μl reakcijski sustav) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direct RT Mix | 800 μl |
ddH bez RNaze2O | 1,7 ml × 2 |
| ||
Komponente kompleta (20 μl reakcijski sustav) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-SYBR | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
50× ROX referentna boja | 40 μl | 200 μl |
ddH bez RNaze2O | 1,7 ml | 10 ml |