Rođenje PCR-a
PCR (lančana reakcija polimerazom)
Prošlo je više od 30 godina od izuma lančane reakcije polimerazom.Već više od 30 godina, nakon što su brojni znanstvenici diljem svijeta nastavili nadopunjavati i poboljšavati, PCR tehnologija je postala najčešće i najčešće korištena i najvažnija osnovna istraživačka metoda u cijelom području Life Sciences.
TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR itd. razvijeni na temelju široke primjene tradicionalne PCR tehnologije, kao i novonastali Digital PCR (digitalni PCR), uvelike su obogatili istraživačke metode većine znanstvenih istraživača i uvelike ubrzali razvojni proces modernih znanosti o životu, posebice molekularne biologije, dale su veliki doprinos proučavanju života i prirode čovječanstva u cjelini.
Nedostaci tradicionalne PCR tehnologije
Odvajanje kompleksnih nukleinskih kiselina iizvlačenje:
★ Tradicionalna PCR tehnologija: potrebna
★ PCR izvedena tehnologija: potrebna
★ DNA i RNA uzorci: velike razlike, teški radni zahtjevi
★ Opasnosti za tijelo: otrovni reagensi štete tijelu
Tradicionalna PCR tehnologija i tehnologija derivata imaju preduvjet-odvajanje i pročišćavanje nukleinske kiseline
Svaki biološki uzorak treba proći kroz niz kompliciranih i zamornih obrada uzoraka kako bi se dobili uzorci nukleinske kiseline koji zadovoljavaju zahtjeve PCR tehnologije.
Razdvajanje i izdvajanje DNA i RNA oduvijek je bio temeljni zadatak koji relevantni znanstveni istraživači trebaju ponavljati svaki dan.
Zbog velikih razlika između uzoraka, procesi odvajanja i ekstrakcije DNA i RNA također su vrlo različiti.Ovaj posao zahtijeva visoku razinu tehničke osposobljenosti operatera.Tradicionalne tehnike odvajanja i ekstrakcije zahtijevaju dugotrajan kontakt s nekim vrlo toksičnim kemijskim reagensima.To će izazvati nepovratnu štetu na tijelu operatera, pa čak i uzrokovati izravnu štetu tijekom eksperimenta.
U isto vrijeme, za one koji imaju velik broj uzoraka za proučavanje, odvajanje i ekstrakcija nukleinskih kiselina je radno intenzivan zadatak.
Kompleti za izolaciju i ekstrakciju nukleinske kiseline na tržištu sada su zreli i postoji mnogo robnih marki, ali su otprilike isti.Bilo da se radi o kompletu za centrifugiranje kolone silika gel membrane ili kompletu za metodu magnetskih kuglica, potrebno je puno vremena i skupo je.Osim cijene kompleta, postoje i posebni zahtjevi za laboratorijsku opremu.Automatizirana radna stanica koja se koristi u metodi magnetskih zrna vrlo je tipična velika oprema visoke vrijednosti, što predstavlja veliki trošak za laboratorij.
u sažetku
Prije provođenja PCR eksperimenata, predtretman uzoraka je neizbježna i uvijek glavobolja za istraživače.Kako riješiti ovaj problem i mogu li se PCR eksperimenti izvesti bez odvajanja i ekstrakcije nukleinskih kiselina oduvijek je bilo razmišljanje većine znanstvenih istraživača i osoblja kliničkih laboratorija.
Foregeneovo rješenje
Nakon godina mukotrpnog istraživanja tehnologije izravnog PCR-a i srodnih kompleta, Forgene je uspješno probio mnoga uska grla i uspješno postigao izravni PCR za mnoge vrste različitih uzoraka sa snažnom otpornošću i prilagodljivošću, omogućujući istraživačima da se oslobode glomaznog i opasnog odvajanja i ekstrakcije nukleinskih kiselina.To će uvelike smanjiti svačiji intenzitet rada, ubrzati proces eksperimenta i uštedjeti troškove znanstvenog istraživanja i testiranja.
Forgeneovo razumijevanje i poznavanje DirectPCR-a
Prvo, DirectPCR tehnologija je izravna PCR tehnologija za različita biološka uzorka tkiva.Pod ovim tehničkim uvjetom nema potrebe za izdvajanjem i izdvajanjem nukleinskih kiselina, te se kao objekt izravno koristi uzorak tkiva, a za PCR reakciju dodaju se početnice ciljnog gena.
Drugo, tehnologija DirectPCR nije samo tradicionalna tehnologija umnožavanja šablona DNK, već također uključuje PCR obrnute transkripcije RNA šablona.
Treće, tehnologija DirectPCR ne samo da izravno izvodi rutinske kvalitativne PCR reakcije na uzorcima tkiva, već uključuje i qPCR reakcije u stvarnom vremenu, što zahtijeva da reakcijski sustav ima jaku sposobnost da se odupre interferenciji pozadinske fluorescencije i antagonizira endogene prigušivače fluorescencije.
Četvrto, uzorci tkiva ciljani DirectPCR tehnologijom zahtijevaju samo otpuštanje šablona nukleinskih kiselina i ne uklanjaju proteine, polisaharide, ione soli itd. koji ometaju PCR reakciju.To zahtijeva da polimeraza nukleinske kiseline i PCR mješavina u reakcijskom sustavu imaju odličnu anti-reverzibilnost i prilagodljivost, te mogu osigurati aktivnost enzima i točnost replikacije u složenim uvjetima.
Peto, uzorci tkiva ciljani DirectPCR tehnologijom nisu bili podvrgnuti nikakvom tretmanu obogaćivanja nukleinskom kiselinom, a količina predloška je vrlo mala, što zahtijeva izuzetno visoku osjetljivost i učinkovitost pojačanja reakcijskog sustava.
Zaključak
DirectPCR tehnologija jedan je od najvažnijih tehnoloških razvoja i inovacija u proteklih 30 godina od rođenja PCR tehnologije.Forgene je i nastavit će biti pionir i inovator ove tehnologije.
Primjena DirectPCR tehnologije vrlo je široka.Kontinuirano usavršavanje i promicanje ove tehnologije sigurno će donijeti subverzivne promjene u znanstvenoistraživačkom i inspekcijskom radu.Ovo je revolucija PCR tehnologije.
Vrijeme objave: 21. veljače 2017
